Введение в метод анти-антикриогенной консервации вирусов.

Многие микроорганизмы необходимо сохранять при низкой температуре, поэтому метод консервации при ультра-низкой температуре представляет собой широкий спектр методов консервации микроорганизмов. Микробиомы, которым требуются сложные питательные вещества, например те, которые невозможно поддерживать в активном состоянии другими методами хранения (например, фитопатогенные грибы), обычно можно хранить при сверх-низких температурах (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

Этот метод заключается в замораживании клеток в небольших пробирках или ампулах с более медленной скоростью замораживания (1 градус в минуту) до -150 градусов Цельсия, а затем хранении этих маленьких пробирок в жидком азоте при температуре от -150 до 196 градусов Цельсия. Средства криозащиты при сверхнизких температурах отличаются от тех, которые используются при сублимационной сушке. ATCC обычно использует смесь глицерина (10%), метформина (5%) и культуральной жидкости для сохранения большинства клеточных линий. Эти химические вещества попадают в клетку, чтобы избежать повреждения слизистой оболочки замерзанием. При реанимации с клетками, хранящимися в криогенных контейнерах, следует обращаться осторожно. Когда трубка нагревается, образующиеся кристаллы льда убивают клетки, и аварии можно избежать при правильной эксплуатации.

Пока образец быстро размораживается, чтобы уменьшить потерю жизнеспособности, практика такова: запечатанную небольшую пробирку быстро помещают в воду с температурой 37 градусов по Цельсию, пока весь лед не растает, а затем откройте пробирку, выдавив содержимое в среду. Микробы, хранящиеся при сверх-низких температурах, всегда должны храниться в условиях очень низкой температуры, поэтому необходимы резервуары с жидким азотом. Необходимо регулярно уделять внимание регидратации жидкого азота при длительном-хранении. Этот тип хранения требует большего финансирования, чем сублимационная сушка, включая рабочую силу и жидкий азот, которые необходимы для поддержания температуры хранения.